Analüüsid> Mikroskoopiline (bakterioskoopiline) Gram-värvitud lima uurimine nakkuslike ja põletikuliste protsesside diagnoosimisel

Teave edastatakse saidil ainult viitena. Kindlasti konsulteerige spetsialistiga.
Kui leiate tekstis vea, kirjeldage ebaõiget tagasisidet või ebakorrektset teavet, siis palun teavitage sellest saidiadministraatorit.

Selle saidi postitatud arvustused on nende kirjutanud isiklikud arvamused. Ärge ise ravige!

Naine naiste taimestiku kohta: mis määrab selle, kiirus ja patoloogia

Globaalset taustapilti - sageli määrab günekoloogide analüüs. Mida ta näitab ja millised eksimused on tema kontol olemas?

Seda analüüsi võib nimetada üldiseks. See on esmane diagnoos, mis võimaldab arstil kinnitada või eitada põletikulise protsessi esinemist tupes, ureetras, emakakaela kanalis ja teha ka teatavaid järeldusi võimaliku menopausi või kliiniliste muutuste kohta patsiendil.

• mikroskoopiline (bakterioskoopiline) Gram-peitsitud mustus on ametlik nimi;
• genitaalide limas;
• bakterioskoopia;
• mikroskoopia.

Kasutatakse nakkuslike ja põletikuliste protsesside diagnoosimiseks. Bakterioskoopia võimaldab teil tuvastada baktereid naiste suguelunditel: kõige lihtsamad mikroorganismid - gonokokid, provotseerivad gonorröad, trikhomoniaasi põhjustavaks aineks trichomonasid. Mikroskoobi spetsialist näeb ka mõningaid baktereid, seeni (Candida), peamised rakud (bakteriaalse vaginosisese märgi). Mikroorganismi tüüp määratakse selle kuju, suuruse järgi, samuti selle, kas see värvitakse värviga või mitte, st on grampositiivne või gramnegatiivne.

Lisaks sellele arvutatakse igast punktist (võetud tupest, ureetrist, emakakaela kanalist) leukotsüütide arv vaateväljas. Mida rohkem neist - seda rohkem väljendub põletikuline protsess. Epiteeli ja lima prognoositav kogus. Ovulatsiooni ajal on menstruaaltsükli keskel korterpütielium eriti rikkalikult reproduktiivse vanuse naistel.

• tupe kandidoos (punetus);
• bakteriaalne vaginoos (varem nn garderelloos);
• gonorröa;
• trikhomoniaas.

Kui ühegi nimetatud haiguse kohta pole selgeid märke, kuid määrdumine on halb, viiakse läbi materjali põhjalik uuring - sooritatakse tagumik.

Kasvatamise põhjused günekoloogias

1. Kui leelis on mõõdukas või suur hulk leukotsüüte, kuid nakkuse põhjustaja ei ole teada. Mikroskoopia tõttu on mikroorganismide avastamise piirmäär 10 kuni 4-10-5 kraadi.
2. Kui avastatakse mikroob, määratakse see tundlikkus antibiootikumide suhtes.
3. Kui on seeninfektsiooni tunnuseid. Selleks, et täpselt määrata seene tüüp ja määrata tõhus antimükootiline ravim.

Muud tüüpi seened Candida ei saa ravida, kui puuduvad patoloogilised sümptomid.

Kui leiatakse võtmekarme (bakteriaalse vaginosismärgid), siis on olemas ka muud mikroobid. Identifitseerimiseks.

Millised on erinevad tagakülg, taimestikud ja tupe puhtus?

Uurimismeetodis. Üldise määrdumisega värvitakse klaaspaberile hoitav materjal spetsiaalsete värvainetega ja vaadeldakse mikroskoobi all. Ja kui bakterioloogilised (metsloomade, kultuuride, mikrobioloogiliste) uuringud on läbi viidud, siis neid kõigepealt "külvatakse" toitainekeskkonnas. Ja siis paari päeva pärast nad vaatavad mikroskoobi alla - millised mikroorganismide kolooniad on kasvanud.

See tähendab, et kui me räägime ekspress-analüüsist, antakse teile arvamus ainult leukotsüütide, epiteeli ja lima arvu kohta. Külv ei ole kiire

Samuti mikroskoopia abil saate kiiresti kindlaks teha tupe tase. Siin hindab arst ainult normaalse, tingimuslikult patogeense ja patogeense mikrofloora vahelist suhet.

Vagiina puhtuse klassikaline hindamine.

Mis arst ei näe mikroskoopiaga

1. Rasedus Selle kindlaksmääramiseks ei ole määrimine vajalik ja ükskõik milline tulemus seda näitab. Te peate läbima hCG vereanalüüsi, läbima günekoloogilise kontrolli arsti või emaka ultraheli abil. Korioloogilist gonadotropiini on võimalik tuvastada uriinis, kuid mitte genitaalidest väljumisel!
2. Emaka ja emakakaela vähk. Endomeetriumi pahaloomulise degeneratsiooni diagnoosimiseks on vaja histoloogilist materjali ja suurtes kogustes. Ja võtke see otse emakast koos eraldi diagnostilise kuretaažiga.

Emakakaelavähk ja muud patoloogiad (erosioon, leukoplakia, koilitsütoos, HPV kahjustused, atüüpilised rakud jne) põhinevad tsütoloogilise uuringu tulemustel. See analüüs tehakse vahetult emakakaelast, transformatsioonivööndist vastavalt spetsiifilisele meetodile Papanicolaou värvimisega (seega ka analüüsi nimi - PAP-test). Seda kutsutakse ka onkotsütoloogiaks.

Esimesed neli infektsiooni diagnoositakse PCR abil. Samuti on võimatu tuvastada immuunpuudulikkuse viiruse esinemine kõrge täpsusega. Sa pead läbima vereanalüüsi.

Kuidas valmistuda analüüsimiseks ja millal see on vajalik

Arst võtab günekoloogilisest toolist (olenemata sellest, kas ta on rase või mitte) patsiendilt määrdumist spetsiaalse pintsli või Volkmanni steriilse lusikaga. See ei tee üldse ja väga kiiresti.

Näiteks on tehniliselt võimalik saavutada hea, isegi täiusliku mao, kui te oma kõhupoed puhastate kloorheksidiiniga või miramistiiniga. Kuid mis siis on?

• dušš;
• seksida;
• kasutada tupe hügieenitooted, intiimseid deodorante ja ravimeid, kui arst pole neid välja kirjutanud;
• tehke ultraheli, kasutades vaginaalset sondi;
• läbima kolposkoopia.
• Enne günekoloogi või laboratooriumi külastamist ei tohi te urineerida 3 tundi.

Annustades insuldi, on vaja menstruatsiooni verejooksu. Isegi kui menstruatsiooni viimasel päeval esineb lihtsalt "paksus", on parem uuringu edasi lükata, kuna tulemus on tõenäoliselt halb - ilmneb suur arv valgeid vereliblesid.

Alkoholi tarbimine ei ole keelatud.

Kas ma võin antibiootikumide võtmise ajal või pärast ravi kohe pärast rasestumist teha määrdumist? See on soovitav seda teha 10 päeva jooksul pärast ravimi (vaginaalne) kohalikku toimet ja ühe kuu möödumist antibakteriaalsete ainete suu kaudu manustamise järgselt.

Kavandatud mikroskoopiline uuring:

• regulaarselt günekoloogi külastamisel;
• günekoloogilises haiglasse lubamisel;
• enne IVF;
• raseduse ajal (eriti juhul, kui määrdumine on sageli halb);
• kui on kaebusi: ebatavaline verejooks, sügelus, vaagnavalu jne

Tulemuste tõlgendamine: mida arvestada normi ja mis - patoloogiat mikroflooras

Kõigepealt juhime teie tähelepanu tabele, milles kuvatakse nn esimese puhtuseastme näitajad. Selles ei mainita ureetrit (kuigi materjal on ka sealt võetud), kuna me räägime günekoloogilistest haigustest. Ureetra ravib põletikulist protsessi uroloog.

Epiteelium - epiteelirakkude arvu ei loeta, kuna sellel ei ole diagnostilist väärtust. Kuid liiga väike epiteel räägib atroofilise emase tüüpi - see juhtub naistel menopausi ajal.

Leukotsüüdid - vaadeldakse "vaatevälja":

• mitte rohkem kui 10 - väike kogus;
• 10-15 - mõõdukas kogus;
• 30-50 - suur hulk, naine märgib patoloogilisi sümptomeid ja arst inspekteerimise käigus diagnoosib põletikulist protsessi tupes ja (või) emakakaelal.

Limas (limaskestad) - tavaliselt peaks olema kohal, kuid suur hulk seda juhtub põletikuga. Ureetris ei peaks lima olema.

Bakteriaalne floora või gr-laktoomorfotüüp - norm, see on tupe kaitsmine bakterite eest.

Emakakaelast ja tupest ei tohiks olla trikhomonas, gonokokk ja peamised rakud terve naise jaoks. Candida puudub ka. Vähemalt märkimisväärses koguses, mis on floora analüüsis tuvastatud.

Sobivuse määrimine ei ole suur. Kui aga naine haiglasse siseneb, siis võtavad nad juurest esialgse eksami ajal oma paremale.

Tavaliselt on tulemused 7-14 päeva. Seega, kui teil on vaja seda enne operatsiooni läbida, tehke see 3 päeva enne haiglasse lubamist. Viimane määratud katse.

Mida leiab bacposseve

Günekoloog suudab kõige paremini dekoreerida kultuuriuuringute tulemusi. Kuid ise, kui luged allpool olevat teavet, analüüsitakse esialgu teie analüüsi.

Mikroorganismide arvu võib väljendada "ristidega":

• "+" On väike summa;
• "++" on mõõdukas;
• "+++" on suur arv;
• "++++" - rikkalik taimestik.

Kuid sagedamini väljendub mikrofloora esindajate arv kraadides. Näiteks: Klebsiella: 10 kuni 4 kraadi. Muide, see on üks enterobakterite esindajatest. Gramnegatiivne pael, aeroobne mikroorganism. Üks ohtlikumaid patogeene, kuigi see on ainult oportunistlik. Seda seetõttu, et Klebsiella on enamikule antibakteriaalsetele ainetele vastupidav (resistentne).

Allpool kirjeldame muid üldisi mõisteid, mis on uuringu tulemustes leitud, või saate arstiga kuulda.

Soor - on candida või mõnel muul viisil - piisk. Seda ravitakse antimükootiliste (seenevastaste) ravimitega.

Pärmi-sarnased seente blastosporid ja pseudomütselium - kandidoos või mõni muu seenhaigus, mida tavaliselt ravitakse sarnaselt piitsuga.

Dipteroidid - tinglikult patogeensed mikroorganismid, teadlaste teadustegevuse tulemuste kohaselt on enamikus naistel umbes 10% mikrofloorast, aga ka streptokokid, stafülokokid, E. coli, gardnerella. Kui taimestik on häiritud, suureneb nende arv.

Leptotrix on aneberobne gramnegatiivne bakter, mis põhjustab leptotrichoosi. Lisateave selle kohta selles artiklis.

Kombineeritud floora on normi variant, kui haiguse sümptomid, täielikult leukotsüüdid või nende tugev tõus (40-60-100) puudub. 15-20 on normi variant, eriti raseduse ajal.

Enterokokid (Enterococcus) esindavad soole mikrofloorat, mis mõnikord sattuda tupest. Gram-positiivsed kookid. Infot enterokokk fekalisest (Enterococcus faecalis) kirjutasime varem. On olemas ka enterokokkoli - E. coli. Tavaliselt põhjustavad ebameeldivad sümptomid kontsentratsioonis üle 10 ° C 4 ° C.

Pseudomonas aeruginosa on gramnegatiivne bakter. Sageli mõjutab inimesi, kellel on madal immuunsus. Sellel on antibiootikumidele tugev resistentsus, mis raskendab raviprotsessi.

Polümorfsed batsillid on vaginaalse biokinoosi tavaline esindaja. Kui leukotsüütide arv on normaalne ja kaebusi pole, ei tohiks selle esinemine häirida.

Erütrotsüüdid - võib väikestes kogustes olla määrdunud, eriti kui see võeti põletikulise protsessi ajal või kui oli väike määrimine.

Coccus või coccobacterial flora - tavaliselt nakkusliku protsessi käigus tupes või emakakaelas. Kui naisel on kaebusi, on vaja antibakteriaalset ravi - tupevalu.

Diplokokk on teatud tüüpi bakterid (kookid). Väikeses koguses ei tekita kahju. Välja arvatud gonokokk - patogeenid gonorröa. Ta on alati ravitud.

Lõpetuseks nimetame sagedasi lühendeid, mis on kirjutatud analüüsi tulemuste tühjale.

• L - leukotsüüdid;
• Ep - epiteel;
• Pl ep. - lamerakujuline epiteel;
• Gn (gn) -monokokk, gonorröa põhjustav aine;
• Trich-trichomona, trikhomoniaasi põhjustav aine.

Grammiga määrdunud

Bioloogia ja meditsiin

Sõltuvalt rakuseina struktuurist on eubakterite hulka kuuluvad prokarüootideks jagatud kaks suurt rühma. Leiti, et kui fikseeritud eubakteriaalseid rakke töödeldi kõigepealt kristallvioletiga ja seejärel joodiga, moodustati värvitud kompleks. Järgneva alkoholiga töötlemisega sõltub sõltuvalt rakuseina struktuurist kompleksi erinevus: nn grampositiivsetes liikides säilib see kompleks raku ja viimane jääb värvituks gramnegatiivsetes liikides, vastupidi, värvitud kompleks pestakse rakkudest välja ja muutub värviks. (Selle meetodi esmakordselt tegi 1884. aastal Taani teadlane H. Gram (Ch. Gram), kes osales kudede värvimisel, hiljem seda kasutati bakterite jaoks).

Mõnes eubakteris on ülalkirjeldatud viisil värvitud positiivne reaktsioon iseloomulik ainult rakkudele, mis on aktiivse kasvu etapis. Leiti, et protoplastil moodustub värvitud kompleks, kuid rakkude kinnihoidmine rakust või selle leostumine alkoholi järgneva töötlemise käigus määratakse kindlaks rakuseina struktuuriomadustega.

Uimastite värvimine suurendab mikroskoobi tundlikkust, sest setetamata bakterid on halvasti eristatavad isegi 400-1000-ga.

Kõige tavalisem on diferentsiaal Gramvärv, kuigi kasutatakse ka monokroomset värvimist. Grami värv muudab võimalikuks eristada bakterid, mille paks rakusoon on peaaegu täielikult peptiidoglükaani (grampositiivne) bakteritest, mille rakuseinal on lisaks peptiidoglükaani õhukesele kihile välimine membraan, mis koosneb lipoproteiinidest ja lipopolüsahhariididest (gramnegatiivne). Peamine värvaine (näiteks kristallvioletne) kinnitatakse gram-positiivsete bakterite seinas kindlalt, andes neile sinistmust värvi ning kergesti pestakse gram-negatiivsete bakterite seest koos alkoholiga (või atsetooniga), pärast mida värvitakse kontrastne värv (nt safraniin) punaselt.

Grami värvimine on hädavajalik rämpspostite uurimisel. Kui röga on õigesti saanud, nähakse vaatevälja väikese suurendusega vähemalt 25 neutrofiilit ja vähem kui 10 epiteelirakku. Suurem arv epiteelirakke ja mitut tüüpi baktereid näitab, et röga on saastunud orofarünksi sisuga. Kuigi sageli on tavapärase mikrofloora patogeensetest bakteritest raske eristada, pakuvad Grami määrdumisvastased plekid väärtuslikku teavet, kui patogeensel bakteril on sellegipoolest teada (bioloogiline signaal). Näiteks bakteriaalses vaginoses on tupe rasvumisel nähtavad grampositiivsete bakteritega dottedega epiteelirakud.

Ekskrementide mikroskoopia määrdunud gram-värviga, mida kasutatakse sõeluuringuna. Neutrofiilide tuvastamisel alustatakse bakterioloogilisi uuringuid ja Clostridium difficile'i poolt toodetud toksiinide määramist.

Grami-plekki kasutatakse ka bakterite ja valgete vereliblede tuvastamiseks CSF-i, sünoviaal-, pleura- ja kõhukelmevedelikes. Meetodi tundlikkus on 10 000 bakterit 1 ml kohta.

Tundlikkuse suurendamiseks tsentrifuugitakse katses kasutatavat vedelikku ja valmistatakse värvitud rasvavõre. Seda protseduuri nimetatakse rikastusmaterjaliks. See on lihtne ja eriti väärtuslik, et tuvastada baktereid ja valgeid verelibledeid CSF-s ja happekindlates bakterites röga.

Viited:

Üldkeelse bakterioloogia meetodid

Maalimismasinad. Määrdiste värvimiseks kasutage värvilahendusi või tindipaneelit, nagu soovitas A.I. Sinine. Valmistamise lihtsus, kasutusmugavus, samuti tindi paberi hoidmine piiramatu aja jooksul olid aluseks nende laialdasele kasutamisele erinevates värvimismeetodites.

Värvimiskad värvipaber. Kuivale ja kindlale ettevalmistusele lisatakse mõni tilk vett, kantakse 2 x 2 cm värvilised paberid. Kogu värvimisperioodi vältel peaks paber jääma märjaks ja tihedalt klaaspinnale kinni. Kuivatamisel paber täiendavalt niisutatakse veega. Rasvavärvi kestus määratakse värvimismeetodi järgi. Värvimise lõpus eemaldatakse paber hoolikalt pintsliga ja määrde pestakse kraaniveega ning kuivatatakse õhu või filterpaberi abil.

Värvimahutite värvimine. Kuivatatud ja fikseeritud preparaadiga kantakse värvaine pipetiga sellises koguses, et see katab kogu mao. Kui määrdeid värvitakse kontsentreeritud värvide lahustega (Zielya karboolse fuksiini, karboolse gentiani või kristallvioletiga), värvitakse need läbi filterpaberi, mis säilitab värviosakesed: filterpaberi riba pannakse fikseeritud õliga ja valatakse sellele värvaine lahus.

Mikroskoopiliseks uurimiseks värvitakse ettevalmistatud, kuivatatud ja fikseeritud määrded. Värvimine on lihtne ja kompleksne. Lihtne värvimine seisneb kindla värviga lakki teatud aja jooksul. Kõige sagedamini kasutatakse lihtsat vesivärvi alkohol-vesi (1:10): Pfeiffer fuchsin, Leffler metüleensinine ja safraniin. Eosiini, nagu happelist värvi, kasutatakse ainult rakkude tsütoplasma peitsimiseks ja tausta värvimiseks. Hapu magenta on bakterite värvimiseks täiesti sobimatud.

Lihtsa värvusega tajuvad mikroobsed kehad värvaineid, mida kasutatakse nii intensiivselt kui raku tuumad; samal ajal värvitakse tsütoplasma ja kogu rasvavaru taust (kui see pole puhta kultuuriga määrimine) sama värvi, kuid mõnevõrra palavam. Fuchsin ja samanlilla on intensiivsemad värvid; metüleensinine plekid palju palavamad. Värvuse tajumine sõltub mitte ainult värvide omadustest, vaid ka värvitud mikroobide omadustest. Enamik mikroobe on kerge ja kiiresti värvitud vee või alkohol-vesilahuste värvidega.

Raskelt värvitavate mikroobide (nt tuberkuloosi tekitaja) või nende osade (eosed, vibraatorid jne) puhul tuleb kasutada intensiivsemaid (sunnitud) värvaineid.

Värvaine on võimalik sundida: a) suurendades põhivärvide värvimisvõimet, b) pikendades värvimistingimust ja c) hakkliha toimet.

Värvimõõdu suurendamiseks puutub värv kõrgel temperatuuril (kuumutamine), kuni ilmub aur (isegi keeb). Muutades kütte taset, on võimalik saada erineva värvuse tugevust.

Värvuslahuse mõju pikendamine objektile võib teatud määral ka suurendada värvimäära.

Mordandid on ained, mis hõlbustavad värvi sisenemist rakkudesse: fenool, tanniin, äädikhape ja kroomhapped, leelised jms. Häirete toimemehhanism on erinev: mõnedel juhtudel mõjutavad värvained teket, teistel juhtudel mõjutab rakkude võimet värvitunde. Mähised toimivad määrdumisel kas enne värvi toimimist (näiteks, kui värvitakse vibulaskmine) või koos värviga (fenool Tsili fuchsinil) või pärast värvimist (Lyugolevski lahus grammi meetodil).

Pealetrükkide maalimisel kasutatakse lisaks värvidele ka nn pleekimis- või värvaineid. Viimane aitab eemaldada liigset värvi kogu mikroobarakkust või selle osast, kui värv on materjali adsorbeerimisel liiga intensiivne või kuumutusest ümber värvides jne.

Valgivate ainetena kasutatakse järgmist: alkohol, 5% väävelhappe vesilahus, 20-30% lämmastikhappe vesilahus, 3% vesinikkloriidhappe lahus absoluutalkoholis jne.

Plaastrite joonistamiseks on vaja töölauale pudelites (parem kui oranž klaas) värvimislahendusi koos pipettide ja kummikabiinidega. Viaalid peavad olema märgistatud asjakohaste nimetustega; Et vältida värvimärgistega kiiret saastumist, soovitatakse seda leotada sulatatud parafiiniga (kasutades pintslit). Värvialused asetatakse puidust statiiviplokile (joonis 2).

Joon. 2. Värvipudelid

Värvide ja loputamisemärkide pesemiseks on vaja destilleeritud vee jaoks mõeldud tuubi pudeli ja määrdeainega (drenaažikast), millel on pisarad. Sillahoov koosneb kahest klaasist torudest või pulgadest, mis on otstes ühendatud kummist torude tükkidega. Seibi laius peaks olema väiksem kui slaidi pikkus. Lisaks on vaja määrida alkohol (või gaasipõleti) ja mikroskoobi slaidide kornetipeederid. Kuumutamisel värvides klaasplaati haaratakse pintsettidega ja hoitakse teatud aja jooksul leegi peal. Pikaajalise värvimise korral kasutavad nad küvetid või väikesed tassid, kus nad valatakse värviga ja pange see sisse. Kui samal kellaajal mitmesuguseid määrdeid värvitakse, et vältida prillide kokkutõmbumist, ühendatakse need kaheosaga, millel on õlitatud külg välja ja tugevdatud torudest lõigatud kummist rõngad. Pärast värvimist pestakse tampoonid veega ja kuivatatakse põhjalikult filterpaberi abil.

Viimaste aastate töö on näidanud võimalust säilida värvimise ajal mikroobide, peamiselt spoore, elujõulisust. Seetõttu on piisavate löömade fikseerimine vajalik. Pesevett (värviga värvitud ajal) tuleb ära voolata spetsiaalsesse anumasse, seejärel neutraliseerida, ei tohi kasutatud filterpaberit (pärast määrdunud kuivatamist) visata, kuid põletada ja kasutatud määrid desinfitseerida.

Lihased mustrid

Lihtsa maalimisviisiga valatakse paar tilka mõnda alkoholivett või vesilahuselist kihti 1-2 minutiks; Selleks otstarbeks kasutatakse enamasti Fuchsini (1:10) või Leffler metüleensinist. Seejärel pestakse värv destilleeritud veega ja määrdeõli kuivatatakse kahe filterpaberi ribade vahel. Tavaliselt fuchsin (1:10) värvi 10-30 sekundit ja metüleensinine - 2-10 minutit. Fuchsini plekid määrduvad intensiivsemalt ja värvitakse metüleensinisega, saadakse õrnad, elegantsemad ettevalmistused. Filtrpaberiga kuivatamine peab olema täiesti kuiv, vastasel juhul, kui järelejäänud niiskus puutub kokku seedripuuõli, moodustub emulsioon ja mikroskoopia tekitab varjatud kujutise. Üldiselt sõltub värvimise kestus värvimislahuse tüübist ja kvaliteedist, mikroobi tundlikkuse määrast värvimisele ja rasvade paksusele.

Muromtsevi värvimine

Valmistage kaks lahendust:

Karboolhape (kristalne)

Pärast värvi lahustamist segatakse mõlemad lahused ja filtreeritakse läbi paberfiltri. Värv püsib pikka aega. Määrdepabereid värvitakse 15-30 sekundi jooksul läbi filterpaberi ribade.

Autorid soovitavad valmistada segu alkoholist (80 osa) formaliiniga (20 osa) 3-10 minuti jooksul.

Selle mikroobide rakkude määrdumisega tuvastatakse kaasamine, bipolaarsus, kapslid ja eosed. Meetod sobib värvimiseks mao, vere, näriliste valkude ja poolvedelate agaritega söötmetes.

Nendest substraatidest pärit ravimi taust on roosa; kudede rakud ja mikroobid on värvitud siniselt-sinise värvusega.

Raske (diferentsiaal) rasvade värvimise meetodid

Komplekssed värvimismeetodid põhinevad mikroobikaareli füüsikalis-keemilisel struktuuril. Nende meetodite olemus seisneb kahe värvaine rasva mõjul, millest üks on peamine (peamine) värv, teine ​​- täiendav (kontrastsus). Pärast esimest värvi kokkupuudet muutub määrdunud värv ja alles seejärel värvitakse värv. Pesuvahendina võib kasutada mitmeid keemilisi reagente (happed, leelised, alkohol, atsetoon jne). Määrdunud pesemine tavalise veega on ka puhtalt mehaaniline pleegitamisprotsess, kuid see nõuab kaua aega; lisaks on värvimuutus puudulik. Plekandavate ainete puhul võib mikroobid kergesti jagada rühmadesse ja neid on raske pleegitada. Mitte kõik mikroobide tüübid ei ole pleegitamisvahenditega võrdselt olulised; mõned neist on happelised ja alkoholikindlad, teised on ainult happekindlad. Lõpuks, mõned, näiteks eosed, vastupidavad jõuliselt kõikide pleegitusainete toimele ja kuuluvad värvkindlate rühmade gruppi.

Komplekssete värvimismeetodite korral on uuritavas mikroobis iseloomulik oluline diferentsiaaldiagnostiline väärtus.

Grami värvimine

Kui töödeldakse määrdeid (sektsioone) mikroorganismide, genitaalvioletse ja seejärel joodi sisaldavatest elunditest ja kudedest, on valmistise värvus musta värvi omaduseks pleegitamine alkoholi toimel. Samal ajal muutuvad mõned leelis sisalduvad bakterid ka värvi muutumatuks, teised aga lilla värviks. Täiendava värvusega (eelkõige Pfeifferi Fuchsiniga) on alkoholiga värvitud bakterid värvunud punaselt (gramnegatiivne). Teised, kes säilitavad kindlalt violetset värvi (jood + gentian-violetne ühend) ja mis ei ole pleegitatud alkoholiga, kuuluvad grampositiivsete bakterite rühma. Erinevus grampositiivsete ja gramnegatiivsete bakterite vahel sõltub nende isoelektriliste punktide erinevusest ja grampositiivsete bakterite võime säilitada värvi seostatakse ribonukleiinhappe magneesiumisoola olemasoluga, mida gramnegatiivsed bakterid ei sisalda. Kõige parem on Grami plekk saada pärast seda, kui määrded on fikseeritud füüsilisel meetodil (küte). Teatud tüüpi bakterite suhtumist eri värvidele, eriti Grami meetodil värvimisele, iseloomustavad mikroobide nn tinctorilised omadused.

Värvimistehnika. Pisut lühema suurusega filterpaberit ja libisemist pannakse kuumusega fikseeritud määrdele ja sellele lastakse piisavas koguses kristallviolett, karbool- või aniliini-punase-violetset lahust või mõnda muud lilla-trifenüülmetaani värvi (näiteks metüülviolet) 1-2 minutit. Seejärel valatakse värv, eemaldatakse filterpaberi riba ja veega pesemata valatakse Lugoli lahus 1-2 minutiks õlini. Lahus kuivatatakse ja värvi värvitakse 96-60 ° C juures 30-60 sekundiks, pestakse veega ja värvitakse Pfeifferi Fuchsini (või lahjendatakse safraniiniga, neutraali või vesuviiniga) 2-3 minutit. Seejärel värv pestakse veega ja määrdepuhast kuivatatakse puhta filtriga.

Mikroskoopiline pilt: kui Gramimähk on õigesti värvitud, on grampositiivsed mikroobid värvitud tumelilla ja graan negatiivsed värvid värvuvad lisavärvina (näiteks Pfeifferi roosa värv fuchsin fuchsin).

Ärge kasutage saastunud filterpaberit: on võimalik mikroobide mehaaniline ülekandmine ühelt määrdelt teisele, mis võib mõjutada mikroskoopia tulemusi. Värvi, Lugoli lahuse (mordandi) ja alkoholiga kokkupuute kestus sõltub rasvavõru paksusest. Eriti oluline grammipigmendi punkt on värvimuutus õliga alkoholiga. Alkoholi lühikese kokkupuute korral saadakse värvitud valmistised ja pikaajaline kokkupuude kõikidel mikroobidel (sh p-positiivsed) muutub värvi muutumatuks. Paksu ja paksu määrdumise korral (näiteks agarikultuurist) peaks alkoholiga kokkupuute aeg olema pikem kui õhuke rasv, eriti vedelate kultuuride korral. Kui paksu osaga ebaühtlaselt ettevalmistatud rasvumisel alkoholiga kokku puutuda, jäid mikroobid muutmata värvimuutusesse ja õhukesed nad muutuvad värvi muutumatuks; sa saad "rohke" värvimustri, mis võib viia valede järeldusteni.

Mõnikord võib gram-positiivsete bakterite kultuuris täheldada gram-negatiivseid baktereid, mis on seda suurem, seda suurem on rahvastiku vanus. See on midagi muud kui bakteriaalsed kehad, mis on läbinud rakusisese autolüüsi, mille tulemusena on rakk kaotanud magneesiumribonukleinaadid. Teisest küljest on enterobakterite perekonna väga noortel kultuuridel (mitu tundi kasvu), nende bakterite hiiglaslikud noorvormid, mis on 2-3 korda suuremad kui täiskasvanud (18-tunnised), on väga basofiilseteks, kuna nende tsütoplasm on ribonukleiinidega üle koormatud. Seega, kui graan värvitakse, värvitakse need magenta värvusega nii intensiivselt, et halva valguse korral võib neid võtta spooride pulgadena grampositiivsete vegetatiivsete vormidena.

Algajatele, samuti kahtlastel juhtudel on soovitav valmistada ettevalmistuspreparaadid samale klaasile, kus katsematerjal asub - üks mikroobide kultuuridest, mis on ilmselt grampositiivsed, ja teine ​​gramnegatiivsetest.

Kui ravimi värvimuutus grammakollases alkoholis võib valada otse õliga, klaasi pidevalt raputades. Parem on värvi muutmine küvettides, kus alkohol valatakse, ning Cornet'i pintsettide võtmisega tõstetakse ja langetatakse ravimeid, jälgides klaasist leviva alkoholi värvi. Värvimuutus loetakse täielikuks, kui õlist levivad alkoholipallid muutuvad küvettides oleva alkoholiga värvi võrdsel määral; tavaliselt kulub 10-30 sekundit, sõltuvalt löögi paksusest.

Küpsetamisel tuleb alkoholi 96 ° C sagedamini asendada (80 ° alkohol ei erista määrdumist). Tavaline alkohol valatakse kviidist alkoholipõletitesse.

Algajatele võib soovitada värvimuutusi ududele joodatud alkoholiga. On kindlaks tehtud, et kui värvi värvivale vedelikule lisatakse väike joodivahus, siis mikroobid, mis on värvitud grampositiivselt, ei värvi isegi sellises vedelikus tund aega ja gram-negatiivsed värvid on umbes 5 sekundi jooksul värvitud. Savatejevi sõnul piisab, kui lisada 100 ml 95 ° C alkoholile 2-4 ml 10% joodi tinktuuri; lahendus võib püsida pikka aega. Kui alkoholi asemel kasutatakse atsetooni, lisatakse enne kasutamist jodi Tinktuuari.

Kaks minutit on joodatud alkoholiga määrdunud värvimuutus, millele järgneb pesemine veega ja täiendav Pfeiffer-fuksiini värvimine.

Grami värvimeetodi muutmine

Nagu eespool mainitud, on bakterite identifitseerimiseks kõige olulisem meetod Grami värvimiseks. Teoreetiliselt on võimalik baktereid jagada kahte rühma: grampositiivne ja gramnegatiivne; tegelikult esineb juhtumeid, kus samu baktereid iseloomustati kui "gram-seletatiivseid". Kuna 1875. aastal töötas Christian Gram esmakordselt välja meetodi, on avaldatud arvukalt Grammi värvimuutusi. Bakterite määrimine klaaslilli värvimiseks saadakse otsese meetodi abil kultiveerimisest vedelal või tahkel keskel, kuid kõige parem on see valmistada formaliiniga fikseeritud, pestud proovist. Mõned täiendavad minutid, mis kulutatakse 5% (v / v) formaliini bakterite suspendeerimiseks, tsentrifuugides kogudes ja pesades, tasuvad end ära, kuna rakkude suurus ja kuju on hästi säilinud, rakud värvitakse ühtlaselt ja vedelas kultuurisöötmesse juhuslikult hajutatud sademed ei ole olemas. Igal juhul on soovitatav õhu käes kuivada ja määrida see kuumutades nagu lihtsa värvimise korral. On oluline standardiseerida grammi määrimist meetod. Sarnased tulemused annavad veel kaks värvuse meetodit - Hookeri modifitseerimisel ja Burke'i modifitseerimisel.

Grami värvimine Hookeri modifikatsioonis.

Lahus A värvaine reagendi valmistamiseks:

Kristallviolett (90% kuivainesisaldusega)

95% (maht / maht) etanool

Lahus B värvaine reagendi valmistamiseks:

Kristallviolet värvaine reagendi saamiseks segatakse lahused A ja B. Lastakse 24 tundi ja enne filtri kasutamist filtri abil.

Joodi ja kaaliumjodiidi purustatakse mördi ja pidevalt jahvatatakse aeglaselt vett, kuni jood lahustatakse. Säilitage pimedas kolvis.

Lahusti värvimiseks:

95% (maht / maht) etanool

Safraniin O [2,5% (mass / maht) 95% (maht / maht) etanool]

Kuumuses määrdunud õhu käes kuivatatud bakteriaalne rasv pannakse kristallviolett värvimissaadusesse 1 minutiks.

Määrdumist pestakse 2 sekundi jooksul nõrga kraanivee nurga all.

Limaskesta asetatakse 1-minutisse joodipulbrisse.

See pestakse nõrgalt, jookseb kraanivee nurgajõu all 2 sekundit, mille järel see kuivatatakse kuivatuspaberiga.

Loputada 30 sekundit 95% -lises etanoolis olevat mustrit, värskendades viimast, seejärel loputada määrdunud paberiga.

Loputage määrdumine 10 sekundi jooksul täiendavas värvis.

Limaskesta pestakse kraanivee nõrgalt nurga all, kuni värv on äravoolus kadunud, mille järel see kuivatatakse kuivatuspaberiga.

Grami värvib Burke'i modifikatsioonis.

Kristallviolett (90% kuivainesisaldusega)

Mordant valmistatakse samamoodi nagu Hookeri modifitseerimiseks.

Värvimuutuslahusti: (ettevaatust, tuleohtlik!)

Safraniin O (85% kuivainesisaldusega)

Õhku kuivatatud ja kuumutamisega fikseeritud õliga pannakse lahusesse A, lisatakse 2-3 tilka lahust B ja inkubeeritakse 2 minutit.

Määrdunud pestakse joodipulbriga ja seejärel kaetakse see 2 minuti jooksul värske sulatatud ainega.

Vatit pestakse 2 sekundi jooksul kraanist nõrgalt nurga all. Määrdepinna ümbritsev pind kuivatatakse kuivatuspaberi abil, kuid määrded ise on kaitstud kuivamise eest.

Kallutatud klaasist slaidiga libiseb tilkhaaval värvivat lahustit, kuni värv kaob klaasist voolavast lahustist. Pärast seda määratakse õliga kuiv õhk.

See on Grami meetod. Mis on grammi meetod?

Grami meetod on meetod mikroorganismide värvimiseks uurimiseks, mis võimaldab bakterite diferentseerimist vastavalt nende rakuseina biokeemilistele omadustele. 1884. aastal tegi ettepaneku Taani arst G. K. Gram.

Gram-bakterid, mis on värvitud aniliinvärvidega - suguvõsa või metüülvioleti jne, seejärel värv kinnitatakse joodi lahusega. Värvilise ravimi hilisemal pesemisel alkoholiga nimetatakse seda tüüpi bakterid, mis on kindlalt värvilised, grampositiivseteks bakteriteks (tähistatud grammiga (+)), erinevalt gramnegatiivsetest bakteritest (grammides (-)), mis pesevad värvilt.

Kasutamine diagnostikas

Gram-plekk on väga oluline bakterite süstemaatika ja nakkushaiguste mikrobioloogilise diagnoosimise seisukohalt.

Gram-positiivsed kookid (välja arvatud Neisseria perekonnaliikmete esindajad) ja spooride bakterite vormid, aga ka pärm, on need värvitud sinakas-mustas (tumesinine) värvusega.

Paljud udusulged bakterid on gram-negatiivsed, nad muutuvad punaseks, rakutuud muutuvad eredaks punaseks ja tsütoplasma on roosa või karmiinpunane.

Värvimistehnika

Grammide värvimine viitab komplekssele värvimismeetodile, kui mõni värv mõjutab määrdumist, millest üks on peamine ja teine ​​on täiendav. Lisaks värvidele kasutatakse komplekssete värvimismeetodite jaoks pleegitusaineid: alkoholi, happeid jne

Grammide värvimine kasutab sageli trifenüülmetaani rühma aniliinvärvaineid: sugurakke, metüülviolett või kristallviolett. Gram-positiivsed Gram (+) mikroorganismid on tihedalt seotud nende värvide ja joodiga. Samal ajal ei muutu nad alkoholiga kokkupuutel värvi muutumatuks, mille tulemusena Fuchsin Grami (+) täiendav värvimine ei muuda mikroorganismid algselt vastuvõetud lilla värvi.

Gram-negatiivsed grammi (-) mikroorganismid moodustavad ühendi aluseliste värvainetega ja joogiga, mis on alkoholi toimel kergesti hävitatud. Selle tulemusena muutuvad mikroobid värvituks ja värvitakse magenta värvusega, omandades punase värvi.

Materjali ettevalmistamine värvimiseks

Katseaine levib hästi rasvatustatud slaidi pinnale õhukese kihina. Ettevalmistatud maarahust kuivatatakse õhus ja fikseeritakse pärast täielikku kuivamist. Histoloogilised sektsioonid valmistatakse rutiinse meetodiga, millega fikseeritakse kudede tükid formaliinis ja valatakse parafiinis.

Kinnitamine

Fikseerides kinnitatakse libisemine libisemise pinnale ja seetõttu mikroobseid rakke ei pesta preparaadi järgneval värvimisel. Peale selle peituvad surnud mikroobrakud paremini kui elusrakud.

Fikseeriv füüsikaline meetod, mis põhineb mikroobse rakuga kõrgel temperatuuril ja keemiliste meetoditega, mis hõlmavad tsütoplasmaalsete valkude koagulatsiooni põhjustavate kemikaalide kasutamist.

Füüsilise fikseerimise meetod

Preparaadiga klaasist slaid viiakse pintsettide või õige käe I ja II sõrmega servade abil harjaga ülespoole ja sujuva liikumisega viiakse need 2-3 korda läbi põleti leegi ülemise osa. Kogu fikseerimisprotsess ei tohiks kesta kauem kui 2 s.

Fikseerimise usaldusväärsust kontrollitakse järgmise meetodi abil: libisemiskindel pind kandub vasaku käe tagapinnale. Kui määrdumine on korralikult kinnitatud, peaks klaas olema kuum, kuid mitte põhjustada põletustunne (70-80 ° C).

Keemiline kinnitusviis

Metüülalkohol, atsetoon, Nikiforovi segu (etüülalkohol 96% ja anesteetilise eetri segu suhe 1: 1), Karnua vedelik (etüülalkohol 96% -60%, kloroform 30%, jää-äädikhape 10%), alkohol -formal (40% formaliin 5 ml, etüülalkohol 96 ° - 95 ml). Kuivatatud õliga klaasist slaid pannakse fikseeriva aine kolbi 10-15 minutit ja seejärel kuivatatakse õhus. Kasutatakse ka mõneks sekundiks 40% formaliini paarist kinni.

Smeari värvimisprotsess

1. Fikseeritud limaskesta korral valage üks põhivärvist 2-3 minuti jooksul. Sademete vältimiseks värvitakse see läbi filterpaberi.
2. Eemaldage värv, eemaldage filterpaber õrnalt. Umbrohtu valatakse Lugooli lahuse või joogi lahusega vastavalt grammile (kaaliumjodiidi ja kristallilise joodi vesilahus suhtega 2: 1) 1-2 minutit, kuni preparaat on mustad.
3. Lahus kuivatatakse, loputatakse 96 ° etüülalkoholi või atsetooniga, valatakse ja tühjendatakse, kuni määrdunud värvused muutuvad ja tühjendusvedelik on selge (ligikaudu 20-40-60 sekundit).
4. Pese klaasi ettevaatlikult jooksva või destilleeritud veega 1-2 minutit.
5. Bakterite gram-negatiivse rühma tuvastamiseks värvitakse preparaate täiendavalt fuksiini või safraniiniga (2-5 minutit).
6. Peske voolava veega ja kuivatage filterpaberi abil.

Bakterite värvimise meetod Gram-Weigert histoloogilistes sektsioonides

1. Deparafiinitud sektsioone reguleeritakse veega.
2. Painutada 20 minutit 1% parasaraniliini või aluselise fuksiini lahuses 1% äädikhappes (värvaine kuumutatakse keemiseni, jahutatakse ja filtreeritakse).
3. Pestakse 3 vahetult destilleeritud veega.
4. Värvige 5 min 1% kristallvioletes destilleeritud vees.
5. Loputa kiiresti 1% naatriumkloriidi lahuses.
6. Segu töödeldi 30 sekundit: 1 osa joodist + 2 osa kaaliumjodiidist + 100 osa destilleeritud veega.
7. Puhastage filterpaberiga.
8. Erineerige sektsioonile aniliini ja ksüleeni (1 - 2 ml) võrdsete koguste segu; lahused kuivatatakse, kuni värvipilved lõpetavad viilast eemaldumise.
9. Viidi läbi pärast 3 ksüleeni muutust.
10. Suletud palsam või ksüleenis lahustatud vaik.

Tulemus: grampositiivsed bakterid on sinist-mustad, violetsed fibriinid, tuumad on punased.

Vaata ka

• Värvaine mikroorganismid
• Aniliini värvained

Lingid

Saksa keeles

• Gramm, HC (1884). "Über die isolaat Färbung der Schizomyceten Schnitt- und Trockenpräparaten". Fortschritte der Medizin 2: 185-89.

Inglise keeles

Mikrobioloogilised uurimismeetodid

Mikrobioloogiliste uuringute eesmärk on kindlaks teha teatud mikroorganismide etioloogiline roll haiguse või kliinilise sündroomi korral. Tuleb meeles pidada, et reproduktiivse süsteemi elundite põletikuliste protsesside põhjustajad võivad olla nii tupe normaalse mikrofloora kui ka teiste biotoopide mügielemendi UPM-i esindajad ja STI-de põhjustavad ained. Selline seos STI-de ja oportunistlike infektsioonide vahel (mille põhjustab DMP) määrab vajaduse integreeritud lähenemisviisi järele mikrobioloogilisele diagnoosile.

INDIKATSIOONID

Mikrobioloogilised uurimismeetodid on nakkushaiguste tõestamiseks või välistamiseks.

MEETOD

KLIINILISTE MATERJALIDE KASUTAMISE EESKIRJAD

Ureetlast väljutatav kogus võetakse alumiiniumist traadi abil plast ühekordse steriilse bakterioloogilise silmusega, mille maht on 1 μl või õhuke dakroni tampoon. Ureetra välise avanemisega tuleb puhastada marli või vatitupsuga. Ilmse sekretsiooni puudumisel võib arst läbi viia kusejuhi kerge massaaži. Tampon / silmus sisestatakse ureetrasse 1-2 cm võrra ja eemaldatakse külg- ja tagaseinte kergelt vajutades. Mikroskoopiliste ja immunofluorestsentsuuringute jaoks viiakse materjal üle klaaslileid, tembeldades valtsitud tampooniga või liigutades silmuse kerge survega materjali üle selle. Kultuuri ja PCR-i jaoks asetatakse materjal sobivatesse transpordivahenditesse torudesse.

Välised suguelundid, tupe lõpus: patoloogiliselt muudetud piirkondades steriilsete puuvillaste (Dacron) tampoonid; vestibeli suurte näärmete põletikul, läbitakse punktsioon, ja kui abstsess on avatud, tõmbavad näärmed steriilset vatitampooni.

Vagina: pärast peegli ja lifti sisestamist võetakse heide välja steriliseeritud vatitampooniga tagumise küünte või limaskestade patoloogiliselt muudetud lõigudest; Kultuuri eesmärgil paigutatakse tampoon steriilsesse torusse ja saadetakse kohe laborisse. Kui seda nõuet ei saa täita, viiakse proove katseklaasi transpordivahendiga.

Mikroskoobi jaoks viiakse proov võetud klaasist slaidi, tembeldades klaasi kõik küljed, püüdes materjali ühtlaselt jaotada, säilitades biokonsoosi kõigi koostisosade loomuliku seose; määrdeõli kuivatatakse õhus, fikseeritakse 96% etanoolilahusega (2-3 tilka pesu kohta kuni täieliku aurustumiseni), märgistatud klaasist ja laborisse saadetavasse suletud anumasse. Trikhomoniaasi kultuuri diagnoosimise ajal viiakse võetud heide viivitamatult toitainekeskkonda ja transporditakse laborisse.

Cervix: pärast emakakaela kokkupuudet peeglites töödeldakse emaka vaginaalset osa hoolikalt steriilse 0,9% naatriumkloriidi lahuse või veega niisutatud vatitupsuga, seejärel sisestatakse õrnalt emakakaelaversesse kanalisse emakakaela kanal, eemaldatakse tampon ilma tupe seinu puudutavata, ja asetage see katseklaasi kultiveerimissöötmesse. Mikroskoopia läbiviimiseks immunofluorestsentsmeetodil erinevate modifikatsioonide, viroloogiliste uuringute või PCR abil võetakse materjal spetsiaalse harjaga, mis sisestatakse kanalisse pärast lima pistiku eemaldamist või kultuuriproovi võtmist. Pärast tampoonipuhja sisestamist emakakaelas kanaleid pööratakse see mitu korda 1-2 cm võrra, et saada rakulist kraapimist, kuid vältida tamponi kärbumist ja vere elemente. Kasutatav materjal asetatakse katseklaasidesse sobivasse kandekeskkonda. Mikroskoopiliste ja immunofluorestsentsuuringute jaoks võetakse proovi viivitamata tampoonist klaasi slaidini.

Uterus: emaka materjalist teadusuuringuteks on võimalik saada ainult spetsiaalse seadme abil, millel on süstla aspiraatori välimine kate. Asepsise reeglite järgimine läbib emakakaela kanalit ja emakas avage süstla välimine membraan, seejärel aspireerige sisu. Seejärel sulgege välimine kate ja eemaldage sondi emakas.

Emaka lisandid: infektsiooni allikast pärit materjali saab omandada ainult kirurgilise sekkumisega (põranda, eksudaadi, biopsia materjali) või kasvaja-sarnaste moodustumiste diagnostilise punktsiooniga vaagnapõhja kaudu vaginaalsed võlvid (kaaluge võimalust saastuda proovi vaginaalse mikroflooraga). Mõnel juhul, kui emaka infektsiooni koht emakaga on seotud emakaga, võivad emakakaela kanali korduvad uuringud olla kasulikud, kui uuringu tulemused on sama tüüpi. Uriin: pärast väliste suguelundite põhjalikku loputamist kogutakse steriilses anumas keskmise osa hommikust vabanenud uriin koguses 5-10 ml. Arvestades, et uriinis sisalduvad mikroorganismid hakkavad toatemperatuuril mitmekordistuma, tuleb proovi viia laborisse 1-2 tunni jooksul, et bakteriuuriaastme kvantifitseerimisel vältida valeandmeid. Kui seda nõuet ei ole võimalik täita, on uriiniproovi võimalik säilitada külmkapis temperatuuril 4 ° C mitte kauem kui 12 tundi.

Veri: verekultuur (baktereemia avastamine) on vajalik, kui te arvate süsteemse põletiku sündroomi tekkimist. Püsiva hüpertermia, külmavärinad, hüpotermia, leukotsütoos, mitme organismi düsfunktsiooni tunnused on veritsuse mikrobioloogiliste uuringute kategooriateks. Vereproovid võetakse võimalikult varakult, alates palaviku tekkest kuni 2-3 korda 30-60 minutiga ülemiste jäsemete perifeersetest veenidest (palaviku kõrgenenud vererõhk ei suurenda meetodi tundlikkust, haiguse etioloogia tuvastamisel muutub vajalikuks vere optimaalne hulk). Kasutatav standardsete kaubanduslike pudelite kasutamine ettevalmistatud toitainekeskkonda aeroobsete mikroorganismide ja rangete anaeroobide kasvatamiseks. Eriline tähelepanu aseptiku eeskirjade järgimisele: veenipunktsiooni kohale töödeldakse 1-2-protsendilist joodi või povidoniodiini lahust keskmise ja äärega liikumisega vähemalt 1 minuti jooksul. Pärast desinfitseerimist on veenipunktsiooni ala palpatsioon vastuvõetamatu. Vahetult enne veeni läbitorkamist töödeldakse nahka 70% etanoolilahusega. Manipulatsioon viiakse läbi steriilsetel kindadel. Pudelist eemaldatakse plastist korgid, pühitakse kummist korgid 70% etanoolilahusega. Pärast vere vereringe võtmist muudavad need nõela ja tõmmatakse kummikorki läbistava viaali kaudu veri (mõlemas viaalis on ligikaudu 10 ml verd). Alla 1-aastastel lastel võetakse ühes pudelis 0,5-1,0 ml verd. Lastel vanuses 1 aasta kuni 6 aastat on vere kogus kokku 1 ml iga eluaasta kohta ja see maht jaotatakse kahe pudeli vahel. Lastel ja täiskasvanutel, kes kaaluvad 30 kuni 80 kg, jagatakse kahe viaali vahel 10-20 ml verega.

Perifeerse veeni ja kateetrist ühe proovi võtmine on lubatud ainult erandjuhtudel: vajaduse korral tuleb tuvastada kateetri-ga seotud baktereemia või veenipunktsiooniga seotud objektiivsete raskuste korral.

KLIINILISTE PROOVIDE MIKROSCOPILINE UURIMINE

Mikrobioloogiliste uuringute oluline etapp STI-de ja oportunistlike infektsioonide diagnoosimisel. Võimaldab anda esialgse hinnangu, kvalitatiivne ja kvantitatiivne koostis mikrofloora patoloogilise keskenduda, hinnata kvaliteeti lüüa materjali (mis vastab selle saidi põletiku, nagu juuresolekul tupeepiteelis sisse tampooniga emakakaela kanal, see kujutab endast rikkumist valiku eeskirjad biotestid), samuti tuvastada mikroorganismid ei kasva tavalistes toitainekeskkondades (gonokokid, trikhomonaadid, rangelt anaeroobsed bakterid).

Valgusmikroskoopia meetodi tundlikkus on mikroorganismide tuvastamisel 4-5 lg CFU / ml ja rohkem. Seetõttu võib mõnedel juhtudel mikroskoopia abil tuvastada etioloogiliselt olulisi mikroorganisme. See viitab peamiselt rangelt anaeroobsetele bakteritele, millel on tavaliselt madala patogeensusega võime, nende etioloogiline roll avaldub kõrge kvantitatiivse taseme korral pärast nakatumise allikale kogunemist. Arvestades iseärasuseks mitmesuguseid morfoloogia anaeroobid (bakteroidyprevotelly, fuzobakterii, Mobiluncus, veylonelly, leptotrihii) ja mikroaerofila gardnerelly, nende avastamiseks Gram-värviti tupeäiete heakskiidu näitab nende etioloogilised rolli. Põhimõtteliselt on bakteriaalse vaginoosi ja muude tupeinfektsioonide diagnoosimisel vaginaalsete rasvade mikroskoopia.

Kuid enamikul vabatahtlikest anaeroobsetest DIM-idest ei ole morfoloogilist originaalsust, vastupidi, nende patogeensuse ja tundlikkuse tase antibiootikumide suhtes on väga mitmekesine. Seepärast on UPM-i jaoks vajalikuks kultuuriruumi selle grupi jaoks. Ka diagnoosi bakteriaalse vaginoosi, mikroskoopilise meetodiga on eelis kultuuri uurimisel diagnoosimiseks suhteliselt vähe reproduktiivses eas riigid vaginaalseks microecology: Tsütolüütiline vaginoosi, vahepealset vormi microcenosis, tupeepiteelis atroofia (viimane omadus menopausi eas).

Diagnoos vulvovaginaalsed kandidoosi võib sageli raames läbiviidud vaginaalplekkidele heakskiidu tavastamise värviti määrdumist native elemendid seene pungumise pärmirakke, fragmendid pseudomycelium koos Blastospoorid. Tuvastamine seenerakkudes on määrdub näitab nende suurte koguste (rohkem kui 5/4 lg KMÜ / ml) ja kõige sagedamini kaasnevad rasked leukotsüütide reaktsiooni vaginaalplekkidele ja kliinilisi ilminguid tupepõletikku piisab kinnitada kliinilise diagnoosi vaginaalne kandidoos.

Gonorröa laboratoorses diagnoosimisel viiakse kõigepealt läbi kusejuhi ja emakakaela kanalilt võetud mustuse mikroskoopia (kui pole muid näiteid muude neuronite, neelu, konjunktiivi, pärasoole uurimiseks). Sa peaksid püüdma paralleelselt teha 2 lööki iga lookuse jaoks, et värvida sinist ja grammist. Ägeda gonorröa iseloomustab puudumise või napid arvukatel esindajatel normaalse mikrofloora (laktobatsillid), suur hulk neutrofiilsetes Leukotsüütidel juuresolekul gramnegatiivsete diplococci paigutatud leukotsüüdid (nähtus lõpetamata fagotsütoosi) ja ilma leukotsüüdid. Kroonilist gonorröad iseloomustab mitmekesine mikrofloora olemasolu koos gram-negatiivsete diplokokkidega leukotsüütide sees ja väljas ning suur hulk neutrofiilide olemasolu. Kõige sagedamini võib gonorröa diagnoosi teha grammatiitmikroskoopia alusel. Siiski, rasedad, noorukid ja lapsed kindlasti kultuuri uuringud liikide tuvastamiseks Neisseria gonorrhoeae erinenud mittepatogeenne Neisseria, mis tunnustavad komponendid normaalne tupe mikrofloora tüdrukud, ja juhul, võttes materjali suuneelule peaks olema teadlik paljude liikide mittepatogeenne Neisseria nendes määrdub igal vanus

Mikroskoopiline meetod jääb praeguseks urogenitaalse trikhomoniaasi diagnoosimiseks peamiseks. Tehke natiivse ravimi ja / või värvitud määrdumise uuring. Natiivse ravimi mikroskoopia puhul on oluline meeles pidada, et tuleb uurida värskelt materjali (eemaldatav ureetra, vagiina) - preparaadis ilmneb elus, mobiilne Trichomonas. Selle preparaadi valmistati meetodiga "purustatud" piisad (eritis võetud lisandiga soe, lähedaste kehatemperatuuri 0,9% naatriumkloriidi lahuses on kaetud Katteklaasi) või "rippuvad" tilk (vedrustus võetud sademed pandi süvendisse esemeklaas) ja mikroskopiruyut kui kondensaator on langetatud 400 korda. Sellest materjalist valmistatakse valmistisi värvimiseks metüleensinisega, Gram või Romanovski - Giemsa. Diagnoos määratakse kindlaks Trichomonas vaginalis'e tüüpiliste vormide tuvastamisel määrdudes.

Vaginaalse mustuse mikroskoopia tulemuste hindamisel tuleks pöörata tähelepanu järgmistele punktidele:

• vaginaalse epiteeli seisund: domineerivad pinna, keskmise või parabasooli kihi rakud; juuresolekul niinimetatud "core" naharakud - epiteelirakkude pinnal, tihedasti kleepunud neist gramvariabelnymi väikeste pulkade, varjates raku piirid (joonis 6-1.) või "lozhnoklyuchevyh" rakud - Suurendatud kleepumine epiteelirakkudes grampositiivsete latid, tavaliselt laktobatsillide ( Joonis 6-2);
• leukotsüütide reaktsioon: selle olemasolu, tõsidus, fagotsütoosi ilmnemine, selle lõpetamine;
• mikrofloora koostis: kvantitatiivne ja kvalitatiivne hindamine morfotüüpide ja tinctorial omaduste järgi.

Joon. 6-1. False võti rakud (Gram-smear mikroskoopia).

Joon. 6-2. Normotsenoos (Gram-määrde mikroskoopia). Mikroobide üldsisalduse hindamine viiakse läbi neljapunktilisel süsteemil (meie poolt mõnevõrra modifitseeritud nugentkriteeriumid) - mikroobikaarakeste arv, mis on mikroskoobiga immersiooniga samal vaateväljal avastatud:

+ - vaateväli kuni 10 mikroobset rakku - minimaalne arv; ++ - vaateväljast 11 kuni 100 mikroobarakku - mõõdukas arv; +++ - vahemikus 100 kuni 1000 mikroobset rakku - suur arv;

++++ - rohkem kui 1000 mikrobioloogilist rakku vaateväljas - suur mass.

Vaginaalse mikrofloora kvalitatiivne hindamine hõlmab kõigi morfotüüpide diferentseerumist vastavalt nende tinktoriomadustele ja morfoloogilistele tunnustele. On olemas laktobatsillide, fusobacteria, bakteroidide, mobilunkusovide, leptotrichia, weillonellus'e, gardnerellas, samuti grampositiivsete kookide, koliformipähklite, pärmseenide morfotüübid. Trichomooni ja muud parasiidid on leelis.

Kui kahtlustatakse süüfilist, on T. pallidum'ist eemaldatud erosioonide ja haavandite pimeda välgmikroskoopia ja otsese immunofluorestsentsmeetod AT diagnostilise diagnostika kasutamisel oma diagnostilist väärtust kaotanud. Neid meetodeid kasutatakse juhtudel, kus kliinilised ilmingud esinevad nahal ja süüfilis kahtlustatavatel limaskestadel. Lisaks võib ettevalmistusi mikroskoopiaks valmistada puntrastega piirkondlikest lümfisõlmedest, tserebrospinaalvedelikust, amniootilisest vedelikust. Erozivnoyazvennuyu pinna õrnalt (et mitte saada verejooks) puhastati kasutades marli tampooni niisutatud 0,9% naatriumkloriidi lahusega, seejärel ettevaatlikult avama ja sulgema kaks sõrme aluse haavandid / erosioonid, stimuleerivad seroosne vedelik, mis võtavad bakterioloogiliste loop või õrnalt kohaldatavad erosiooniga pinnaklaasi slaid. Saadud seerumiväljundi segu segatakse võrdse koguse 0,9% naatriumkloriidi lahusega, kaetud katteklaasiga ja looduslik preparaat mikroskoobitakse mikroorganismide tuvastamiseks mitmete iseloomulike morfoloogiliste tunnuste ja liikide liikide tuvastamiseks. Selleks, et mikroskoopiliselt eristada urogenitaaltrakti treponemmekommenaali kahjustatud treponemat, on vaja teatavat kogemust.

Eesmärgiks võib olla otseselt immunofluorestsentsi kasutavate mikroskoopiliste preparaatide diagnoosimine. Nendel juhtudel eemaldatakse kõik kudede vedelike klaasist slaidilt võetud proovid, patoloogiliste piirkondade pinnad (kaasa arvatud lahkuva materjali) kuivatatakse õhus, fikseeritakse etanooli või metanooliga. Seejärel lisatakse preparaadile T. pallidum'ile spetsiifiline anti-treponemaalne globuliin. Agensi mikroskoopiline uurimine tuvastatakse erkrohelise spetsiifilise fluorestsentsi abil.

Immunoluminestsentsmeetod - peamine ja laboratoorselt diagnoositud HG, samal ajal kui patoloogilise materjali valmistamisel tuvastatakse Ag viirus. Tavaliselt kasutatakse otsese immunofluorestsentsmeetodit, mis võimaldab mõlemat tüüpi HSV ja HSV1 ja HSV2 serotüüpe eraldi määrata. Meetodi tundlikkus ja spetsiifilisus sõltuvad kasutatud diagnostikakomplektide kvaliteedist. Uuringu materjaliks on tavaliselt avatud vesiikulite vedelik, naha ja limaskestade erosioonist pindade väljastamine või emakakaelas kanalisatsiooni seinte eemaldamine (latentse infektsiooni vormiga). Materjal võetakse bakterioloogilise silmusega või spetsiaalse tampooniga ja viiakse klaasi slaidile.

Urogenitaalsetes klamidioosides on Ar klamüüdia tuvastamine immunofluorestsentsmikroskoopia abil üks juhtivaid laboratoorseid diagnostikameetodeid. Reeglina kasutatakse immunofluorestsentsuuring, mille käigus kasutab monoklonaalsed antikehad erinevad Chlamydia Ar - lipopolüsahhariidist (multiedastuse), suuremate valguliikide Chlamydia välismembraani Ar ja Ar antikehade rekombinantse klamüüdia. Diagnostika kvaliteet määrab meetodi tundlikkuse taseme. Suur tähtsus hindamise kvaliteedi immunofluorestsentsuuring võtmine materjali on: mustamine kohta klaas võetud proovi emakakaela peab olema kohal silindriline epiteelirakkude ja puudub soomusepiteeli rakud, erütrotsüütide ja leukotsüütide. Tulemust loetakse positiivseks, kui eemaldatava mikroskoobi määrdes fluorestsentsmikroskoobiga epiteelirakkude oranžikaspruunil taustal leitakse vähemalt viit elementaarset elementi, mille suurenemine on 100 korda suurem. Võimalike valepositiivsete tulemuste tõttu ei soovitata seda meetodit ninavere ja pärasoolest saadud materjalide uurimiseks.

KULTUURI UURINGUD

Mikrobioloogilise diagnostika "kuldstandard" on meetod haiguse patogeenide puhaste kultuuride istutamiseks ja isoleerimiseks. Koos mikroskoopiaga on kultuuriuuringud gonorröa, trikhomoniaasi, klamüüdia diagnoosimise peamine meetod. Molekulaarsed ja bioloogilised uurimismeetodid ei ole veel piisavalt spetsiifilised, et neid STI patogeneene tuvastada klassikaliste meetodite asendamiseks, kuid kahtlemata kuulub neile tulevik. Erinev olukord on tekkinud suguelundite oportunistlike infektsioonide korral, mille arv antibiootikumide ajastul ja ühiskonna elurikkuse kasvab pidevalt, nende etioloogiline struktuur ja tundlikkus antibiootikumide suhtes muutuvad dünaamiliselt. Nende mikroorganismide sagedane antibiootikumiresistentsus põhjustab ravi ebaõnnestumist, mistõttu on tänapäevastes tingimustes piisav valik ratsionaalset etiotroopilist ravi pideva kliinilise probleemina.

On teada, et suguelundite põletikuliste protsesside põhjustajad võivad olla erinevad UPM-id, mis tavaliselt moodustavad osa tupe põlisrahvaste (normaalse) mikrofloora ja sellega külgnevate biotoopide mööduvast komponendist. Nende patogeensed omadused ilmnevad ainult teatavatel tingimustel, makroorganismi immuunomöostaasi häirete ja lokaalse koloniseerumisresistentsuse korral. Nendes tingimustes peaks mikrobioloogiline diagnostika arvesse võtma paljude patogeenide võimalikku etioloogilist rolli, mitte ainult mis tahes spetsiifilist patogeeni, nagu absoluutsete patogeenide põhjustatud klassikaliste nakkushaiguste diagnoosimisel. Uuringu ülesanne ei ole mitte ainult patoloogilises materjalis leiduvate mikroorganismide tuvastamine, vaid ka selle etioloogilise rolli põhjendus selle patsiendi põletikulises protsessis. Seega on kliinilise materjali, eriti locitelt ja tavaliselt mikrofloora külvamisel väga tähtis kasutada kõige mitmekülgsemat toitainekeskkonda, mis sobib paljude mikroorganismide kasvatamiseks. Sellisel juhul tuleb arvestada eri tüüpi mikroorganismide kasvu kvantitatiivsete suhetega primaarses külvis, sest tõeline põhjustaja esineb enamasti sidusettevõtete valitsevas rollis. Siiski on liike, millel on väikeses koguses patogeensed omadused (rühmade A ja B streptokokid, Proteus, Klebsiella, Staphylococcus aureus, Listeria jne).

Vagina oportunistlike nakkuste mikrobioloogiline diagnoos põhineb mikroskoopiliste ja kultuuriuuringute tulemuste integreeritud hindamisel. Seega rangelt anaeroobne mikrofloora komponendi mikroskoobiga grammazkov - suure hulga anaeroobse morphotypes valgusmikroskoopiliselt (arv ületab tupest LG 6 CFU / ml), mis näitab nende etioloogilised rolli. Seega anaerobe vastuvõtlikkust antibiootikumid ei ole praegu kliiniliste teostatavust, sest enamik neist on väga tundlikud Antibiootikumide anti-anaeroobse aktiivsust (klindamütsiin, metronidasool).

Vastupidi, fakultatiivsete aeroobsete ja aeroobsete mikroorganismide puhul on tupevermikroskoopilise mikroskoopilise uurimise diagnostilist väärtust oluliselt vähendatud. Selle põhjuseks on esiteks asjaolu, et nende bakterite patogeensed omadused võivad ilmneda suhteliselt väikeses koguses (3-5 μg CFU / ml), mida ei tuvastata mikroskoopia abil. Teiseks, isegi kui fakultatiivsete anaeroobsete bakterite morfotüübid leitakse grammides, on nad paljudes bakterite liikides ja perekondades morfoloogiliselt ühesugused (need on koliformipulgad või grampositiivsed kookid). Samal ajal võivad nende patogeensed omadused ja tundlikkus antibiootikumide suhtes olla väga erinevad. Seetõttu iseloomustamiseks osa fakultativnoanaerobnoy microcenosis ja microaerophilic (peamiselt laktobatsille), mis võib olla sarnane morfoloogia mitmesuguseid obligatnoanaerobnyh baktereid (kolstriidide eubakterid, propioonibakterite jt.), See on vajalik Kultuurid - seemneks tupest. Nendel eesmärkidel kasutatakse 5% vereagarit (enamik UPMi kõige universaalsemat keskkonda), Saburo agarit (seente eraldamiseks), MPC-söödet (laktobatsillide kasvatamiseks).

Tulemusi kultuuri uuringud annavad võimaluse hinnata liigilise koostise ja osakaal erinevate mikroorganismide sidemes, sealhulgas seente ja laktobatsillide ja seega kinnitada perekonda kuuluva Lactobacillus laktomorfotipov need, mis tuvastati mikroskoopia grammazkov. Isoleerimine patoloogilise materjali ja identifitseerimiseks erinevaid sugukonna Enterobacteriaceae, stafülokokk, streptokokid, nonfermenting bakterid, Neisseria, korüneformsed bakterid, seened ja muud mikroorganismid pärast kvantifitseerida nende kasvu kindlaks määral nende etioloogilised olulisuse arengus tupepõletiku konkreetsel patsiendil.

Lisaks juhul, kui diagnoos bakteriaalse vaginoosi paigaldatakse mikroskoopia gramnegatiivsete määrdumiseks kultuuri tulemused võib selguda kõrgenenud tiitrid UTM (seened, enterokokid, kolibakterite ja teistest bakteritest), mis võib põhjustada tüsistusi pärast põhjuslikku ravi ravimitega anti-anaeroobse aktiivsust. Eriti tuleks silmas pidada mikroorganisme, mis isegi loote suurenenud riski (Listeria, Streptococcus rühmad A ja B) on isegi madalates kontsentratsioonides.

Nukleiinhapete identifitseerimise meetodid

DNA ja RNA patogeenide avastamise meetodeid kasutatakse praegu peamiselt viirusnakkuste diagnoosimiseks. Geenidiagnostika meetodid põhinevad nukleotiidijärjestuste identifitseerimisel otseselt patoloogilises materjalis molekulaarsete sondide abil - viiruslike nukleiinhapetega komplementaarsete kunstlikult saadud nukleiinhapete abil, mis on märgistatud biotiiniga või radioaktiivse märgistusega.

PCR-meetodi tunnuseks on mitmekordne kopeerimine (amplifitseerimine, replikatsioon), kasutades spetsiifilise DNA fragmendi DNA polümeraasi ensüümi, mis koosneb mitmest kümnest või saddest nukleotiidi paarist, mis on ainulaadne, see on spetsiifiline selle tüüpi viiruse patogeeni suhtes. Replikatsiooni mehhanism on selline, et fragmendi valmimist võib alustada ainult teatud stardiblokkidega, mille loomiseks DNA teatud piirkondades kasutatakse praimereid - spetsiaalselt sünteesitud oligonukleotiide. Praimerid on komplementaarsed järjestustega konkreetse fragmendi piirides ja DNA süntees toimub ainult nendes piirides.

PCR-protsess koosneb paljudest spetsiifilise DNA fragmendi sünteesi (amplifitseerimise) tsüklitest, suure hulga koopiate akumuleerumisest, mida seejärel saab tuvastada tavapäraste tuvastamismeetoditega (immunofluorestsentsanalüüs, elektroforees).

● teostamise lihtsus; ● täielik automatiseerimine; ● tulemuse saamise kiirus; ● vähese hulga uurimiseks vajaliku patoloogilise materjali olemasolu; ● ägedate, krooniliste latentsete infektsioonide diagnoosimise võimalused;

● taastumatu, püsivate patogeenide tuvastamine.

PCR-tundlikkus on kõige sobivam diagnostilise meetodina (mitu korda suurusjärgu võrra suurem kui teiste testide puhul). Meetodi spetsiifilisus on samuti suur, kuid seni enamik katsesüsteemidest ei ole piisavalt usaldusväärsed, et jõuda välja klassikalisest meetodist isegi absoluutsete patogeenide diagnoosimiseks.

Mis puudutab oportunistlikke infektsioone, siis molekulaarsete geneetiliste diagnostiliste meetodite olulisust ei saa veel tunnetada tähendusrikkana, sest selliste põletikuliste protsesside väljatöötamisel on otsustavaks teguriks kvantitatiivne tegur, mitte mikroorganismi enda esinemine uuritavas lookuses.

Praegu kasutatakse PCR-meetodeid laialdaselt viiruslike, parasiitide ja bakteriaalsete STI-de diagnoosimisel, sageli esmase sõeluuringuna, samuti raviviiside kontrollimist koos teiste labori diagnoosimise meetoditega. Kasutades uusimat tehnoloogiat, nagu reaalajaline PCR ja NASBA, on HIV-patsientidel võimalik täpselt määrata viiruse kogus.

SEROLOOGILISED DIAGNOSTILISED MEETODID

Meetodid, mis tuvastavad spetsiifilised AT ja Ar patogeneesid. Nende roll on oluline eriti siis, kui patogeeni isoleerumine tekitab märkimisväärseid raskusi. Kui tuvastatakse spetsiifiline AT, on vaja kindlaks määrata nende tiitrite tõus, mille käigus uuritakse paaristatud seerumeid 2-3-nädalase intervalliga. Immuunglobuliinide klasside määratlus kirjeldab selgelt nakkusprotsessi etappe ja võib mõnel juhul olla prognostiline märk selle käigus.

Suur tähtsus on Ag-patogeenide avastamise meetodid. Neid saab avastada juba nakkusprotsessi varajasematel etappidel, mis võimaldab ekspresseerida diagnoosi ja Ar-i kvantitatiivne määramine haiguse dünaamikal on ravi efektiivsuse kriteeriumiks.

Süüfilise ja HIV-nakkuse diagnoosimisel on muutunud ülimalt tähtsaks seroloogilised meetodid. HIV-nakkuse diagnoosimisel kasutatakse tavaliselt ensüümseotud immunosorbentanalüüsi, mis võimaldab saada uuringu positiivseid tulemusi juba 1-1,5 kuud pärast nakatumist. Ensüümimonoomianalüüsil põhinevad positiivsed sõeluuringud vajavad kinnitust immunoblotmeetodi abil, mis võimaldab kontrollida erinevate viirusvalkude antikehade olemasolu.

Süüfilise diagnoosimisel kasutatakse praegu mitmesuguseid seroloogilisi meetodeid, mis võimaldavad tuvastada antikehasid erinevatele AH T. pallidumi determinantidele organismis. Sõltuvalt kasutatud Agist on seroloogilised reaktsioonid jagatud kahte rühma: treponemaalne ja mitte-treponemaalne. Esimest kasutatakse skriinimiseks. Need on tehniliselt lihtsad, ei nõua palju aega, on võimalik reaktsiooni kvantitatiivne versioon AT tiitri määramisega, mis võimaldab neid ravimi efektiivsuse hindamiseks kasutada. Kuid need testid ei avasta AT esimese 2-4 nädala jooksul primaarse süüfilise esinemist ning valede positiivsete ja valenegatiivsete reaktsioonide olemasolu on võimalik.

Treponemaalsed testid on väga spetsiifilised ja võimaldavad kinnitada mitte-treponemalsete testide tulemusi. Kuid treponemaalsed testid olid tserebrospinaalvedeliku uuringus ebausaldusväärsed (välja arvatud otsese hemaglutinatsiooni reaktsioon), neid ei kasutata ka ravimi efektiivsuse kontrollina ja ei välistata valepositiivsete reaktsioonide võimalikkust.

Oportunistlike bakteriaalsete infektsioonidega, mille põhjustajatel on palju peremeesorganismi argoolse Ag-ga levinud argente ja mis on spetsiifiliste antikehade tootmiseks nõrgad stimulaatorid, ei kasutata seroloogilisi diagnostilisi meetodeid praktiliselt.

MIKROBIOLOOGILISTE UURIMISTE TULEMUSTE TÕLGENDAMINE

KASUTATAVATE NAISTE GENIITILISTE ORGANITE MIKROBIOLOOGILISTE UURIMISTE TULEMUSTE HINDAMINE

Tulemuste hindamiseks mikrobioloogiliste uuringute eraldati naissuguelundite moonutamine tuleb arvestada omaduste kogum kõigil juhtudel: andmete mikroskoopia primaarse äigepreparaadina katsematerjalile tulemused tüükülv tahkel toitekeskkonnale (koguse hindamiseks kasvu erinevat tüüpi), samuti kliinilise haiguse sümptomeid ja patsiendi haiguslugu. Seega uurimisel materjali suletud õõnt (punktkeratopaatia kasvaja moodustised vaagna lootevett), samuti elundite, tavapäraselt steriilsest (emaka sisu kraapides endomeetriumi tükki elundite ja kudede eemaldati operatsiooni ajal), mikroorganismide kasvu, eriti monokultuuris tõendeid nende etioloogilise rolli kohta. Uuringus materjali loci ja tavaliselt võttes mitmekesine mikrofloora, omistavad suurt tähtsust hinnata liigilise koosseisu mõõta kasvu erinevat tüüpi kasvatatud esmane plaadistus, ühetaolisuse tulemusi korrata ja kliiniliste andmete. Mikroorganismide mikroskoopia ja tupekulguse kultuuri integreeritud hindamise põhjal võib välja pakkuda järgmised mikrobioloogilised kriteeriumid, mis võimaldavad hinnata peremees-naiste individuaalsete nnoloogiliste vormide tupe mikrotsenoosi.

NORMOCENOSIS

• Mikroskoopiline määrdumiseks Gram värviti (joonis 6-3).: ♦ tupeepiteelis sisaldab rakke pinnakihtide vahekiht on vähem levinud rakud (suhe võib varieeruda sõltuvalt faasides menstruaaltsükli raseduse paljud vaheühendi rakud), "võti" rakud puuduvad mõnikord tekivad "lozhnoklyuchevye" rakud; ♦ leukotsüütide reaktsiooni puudub või halvasti väljendatud - üksikult leukotsüüdid vaatevälja; ♦ koguarvust mikroorganismide mõõduka või suure; ♦ domineeriva morphotype - laktobatsillide teiste mo rotidid puuduvad või nende arv arvutatakse

üksikute mikroobide rakud haruldastel vaateväljadel.